Ce kit utilise un test immunosorbant enzymatique en phase solide (ELISA) avec une technique de sandwich à double anticorps pour détecter l'E résiduel. coli (souches d'expression de protéines) protéines de cellules hôtes (HCP) dans les échantillons. Un anticorps polyclonal spécifique aux HCP E.coli (souches d'expression de protéines) a été utilisé dans le test pour capturer tous les HCP restants dans les échantillons. La norme d'étalonnage et les échantillons d'essai ont été simultanément ajoutés à la plaque de microtitrage revêtus d'anticorps de capture purifié d'affinité, et suivis d'une incubation et d'un lavage. L'anticorps biotinylé a été ajouté à la plaque de microtiter pour lier les HCP, puis a réagi avec la streptavidine marquée avec HRP (Horseradish Peroxydase). Le substrat de TMB (3,3 ',5,5'-tétraméthylbenzidine) a été ajouté à la réaction, HRP a catalysé l'oxydation du TMB par H2O2Pour produire un produit de couleur bleue (pic d'absorption maximal à 655 nm). Ensuite, la solution d'arrêt a été ajoutée pour mettre fin à la réaction enzymatique, ce qui a donné un produit de couleur jaune (pic d'absorption maximal à 450 nm). Les valeurs d'absorbance à la longueur d'onde de 450 nm étaient positivement corrélées à la concentration de HCP dans la norme d'étalonnage et les échantillons. La concentration de HCP dans l'échantillon peut être calculée en utilisant la courbe dose-réponse.
| Composants | Condition d'expédition | Taille de l'unité | Méthode de détection |
| Norme d'étalonnage du HCP-E d'E. coli | 2-8 ℃ | 96 Essais | Sandwich ELISA |
| Anti-E.coli HCP-E bandes de microtitration | |||
| Solution de reconstitution | |||
| Diluant | |||
| Concentré tampon de lavage (10 ×) | |||
| HCP-E Anti-E.coli: Conjugué biotinylé (100 ×) | |||
| Streptavidin-HRP (100 ×) | |||
| Substrat TMB | |||
| Solution d'arrêt | |||
| Film d'étanchéité |
| Linéarité et gamme | 1-243 ng/mL, R²>0.990 |
| Précision | Taux de récupération = 87.1%-108.3% |
| LLOQ | 1.5 ng/mL |
| LOD | 0.0113 ng/mL |
| Répétabilité | 3.5%-4.9% (CV≤ 20%) |
| Couverture des anticorps (IMBS-2D) | 70.6%-100% |
| Couverture des anticorps (IMBS-LC/MS) | 88.8% |
| Spécificité | Pas de réactivité croisée avec CHO, Vero, HEK293T, Hansenula polymorpha HCP |
| Robustesse | Incuber à 25 ± 3 ℃, CV≤ 20% |
| Aptitude aux instruments non limitée à Thermo Multiskan FC, Bio-Tek Synergy2 |
SHENTEK®Kit de préparation d'échantillons d'ADN de cellules hôtes résiduelles
SHENTEK®Kit de quantification de l'ADN d'E. coli résiduel
SHENTEK®Kit ELISA E.coli (K-12 et lyse alcaline) HCP
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