Ce kit convient à la quantification de l'endonucléase non spécifique (SMNE) dans le processus de purification des bioproduits. Il peut détecter les endonucléases génétiquement modifiées de Serratia marcescens, telles que la benzonase®Endonucléase.
Ce SHENTEK®Le kit ELISA d'endonucléase non spécifique (SMNE) est basé sur le test d'immunosorbant lié à l'enzyme en phase solide (ELISA) avec une technique de sandwich à double anticorps pour détecter l'endonucléase non spécifique résiduelle (SMNE). Un anticorps polyclonal de mouton spécifique au SMNE a été utilisé dans le test pour capturer toutes les impuretés SMNE restantes dans l'échantillon. Les étalons d'étalonnage et les échantillons d'essai ont été simultanément ajoutés à la plaque de microtitrage revêtus d'anticorps de capture purifié d'affinité et suivis d'une incubation et d'un lavage. L'anticorps biotinylé a été ajouté à la plaque de microtiter pour se lier au SMNE, puis a réagi avec la streptavidine marquée avec HRP (Horseradish Peroxydase). Le substrat de TMB (3,3 ',5,5'-tétraméthylbenzidine) a été ajouté à la réaction, HRP a catalysé l'oxydation du TMB par H2O2Pour produire un produit bleu (pic d'absorption maximal à 655 nm). Ensuite, la solution d'arrêt a été ajoutée pour mettre fin à la réaction enzymatique, ce qui a donné un produit de couleur jaune (pic d'absorption maximal à 450 nm). Les valeurs d'absorbance à la longueur d'onde de 450 nm étaient positivement corrélées à la concentration de SMNE dans l'étalon d'étalonnage et l'échantillon. La concentration de SMNE dans l'échantillon peut être calculée à l'aide d'une courbe dose-réponse.
| Composants | Condition d'expédition | Taille de l'unité | Méthode de détection |
| Norme d'étalonnage SMNE | 2-8 ℃ | 96 Essais | Sandwich ELISA |
| Bandes de microtitrage anti-SMNE | |||
| Diluant SMNE | |||
| Concentré tampon de lavage (10 ×) | |||
| Anti-SMNE: Conjugué biotinylé (100 ×) | |||
| Streptavidin-HRP (100 ×) | |||
| Substrat TMB | |||
| Solution d'arrêt | |||
| Film d'étanchéité |
| Linéarité et gamme | 0.25-25 ng/mL, R2> 0.990 |
| Précision | Taux de récupération = 96.9%-109.9% |
| LLOQ | 0.25 ng/mL |
| ULOQ | 25 ng/mL |
| Limite de détection | 0.0736 ng/mL |
| Répétabilité | 3.4%-7.9% (CV≤ 20%) |
| Spécificité | Pas de réactivité croisée avec des analogues couramment protéiques (e.g. BSA, RNase A, DNase I), HCP (e.g. CHO, 293T, E.coli, Vero) et l'ADN génomique (e.g. Hansenula polymorpha, 293T, E.coli). |
| Robustesse | Incuber à 25 ℃ ± 5 ℃, CV≤ 20% |
| Aptitude aux instruments non limitée à Thermo Multiskan FC, Bio-Tek Synergy2 |
SHENTEK®Kit de préparation d'échantillons d'ADN de cellules hôtes résiduelles
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