P.pastoris HCP ELISA Kit (ELISA en une étape)

Ce kit est basé sur le test d'immunosorbant lié à une enzyme en phase solide (ELISA) avec une technique en sandwich à double anticorps pour détecter les protéines résiduelles des cellules hôtes (HCP) des cellules P.pastoris. Un anticorps polyclonal de mouton spécifique aux HCP de P.pastoris a été utilisé dans le test pour capturer tous les HCP restants dans l'échantillon. La couverture des anticorps est évaluée par la méthode courante actuelle. La norme d'étalonnage (ou échantillon d'essai) et la HRP (raifort peroxydase) marquées avec anti-P.pastoris anticorps HCP ont été simultanément ajoutées à la plaque de microtitrage revêtue de l'anticorps de capture purifié d'affinité, et suivi par l'incubation et le lavage. Ensuite, le substrat de TMB (3,3 ',5,5'-tétraméthylbenzidine) a été ajouté en réaction, HRP a catalysé l'oxydation du TMB par H2O2 pour produire un produit de couleur bleue (pic d'absorption maximal à 655 nm). Ensuite, la solution d'arrêt a été ajoutée pour mettre fin à la réaction enzymatique, ce qui a donné un produit de couleur jaune (pic d'absorption maximal à 450 nm). Les valeurs d'absorbance à la longueur d'onde de 450 nm étaient positivement corrélées à la concentration de HCP dans la norme d'étalonnage et les échantillons. La concentration de HCP dans les échantillons peut être calculée à l'aide d'une courbe dose-réponse.